Contents
viii Orbitrap Fusion Getting Started Guide Thermo Scientific
Setting Up the Inlet Plumbing . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
Setting Up the Inlet for Direct Infusion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
Setting Up the Inlet for High-Flow Infusion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
Setting Up the Inlet for Manual or Auto-Loop Injections . . . . . . . . . . . . . . . 28
Setting Up the Inlet for an LC/MS System with an Autosampler . . . . . . . . . . . 30
Connecting the Grounding Union to the ESI Spray Insert . . . . . . . . . . . . . . . . 31
Chapter 4 Syringe Pump and Divert/Inject Valve . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .33
Syringe Pump . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33
Divert/Inject Valve . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
Configurations . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
Controlling the Divert/Inject Valve. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36
Chapter 5 Preparing the System for Calibration . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .39
Pumping Down the Mass Spectrometer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39
Setting Up the Syringe Pump for Direct Infusion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43
Setting Up the Mass Spectrometer for Calibration. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 44
Chapter 6 Ionization Spray Stability. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .45
Evaluating the Spray Stability . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
Optimizing the API Source Parameters . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47
Chapter 7 Calibrating the Mass Spectrometer in H-ESI Mode . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .51
Running the Positive Ion Polarity Calibrations . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 52
Running the Negative Ion Polarity Calibrations . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54
Chapter 8 Acquiring Sample Data . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .55
Using the Tune Application to Acquire Sample Data . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55
Setting Up the LC/MS System for Analyte Optimization . . . . . . . . . . . . . . . 56
Defining the Scan Parameters for Precursor Optimization. . . . . . . . . . . . . . . 58
Optimizing the Fragmentation Parameters . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 63
Defining the Scan Parameters for the SIM Scan Type . . . . . . . . . . . . . . . . . . 63
Acquiring a Data File By Using the Tune Application. . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
Using the Xcalibur Data System to Acquire Sample Data . . . . . . . . . . . . . . . . . 66
Appendix A Basic Tune Functions. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .69
Opening the Tune Window . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 70
Setting the Instrument Power Mode . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 71
Checking the Instrument Readback Status . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 71
Controlling the Syringe Pump. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 72
Setting the Data Type . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 73
Setting the Ion Polarity Mode . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 73
Setting the Tune Preferences . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 73
Using the MSn Setting Table in the Define Scan Pane . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 74
Using the Favorites Pane to Save System Settings . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 76